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當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞復蘇/凍存人牙周膜成纖維細胞
人牙周膜成纖維細胞

產品簡介

人牙周膜成纖維細胞分離自牙周膜組織。牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙) 是由致密結締組織所構成。多數纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質內,另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內。

產品型號:復蘇/凍存
更新時間:2025-06-30
廠商性質:生產廠家
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人牙周膜成纖維細胞

產品名稱 :人牙周膜成纖維細胞

產品貨號 :YLK-XB0630h

組織來源 :牙周膜組織

產品規格 :5×105cells/T25細胞培養瓶


細胞簡介:

牙周膜成纖維細胞分離自牙周膜組織。牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙) 是由致密結締組織所構成。多數纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質內,另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內。牙周膜內有神經、血管、淋巴和上皮細胞等。成纖維細胞(Fibroblast) 是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。

成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起。6h后細胞基本貼壁WAN全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團。細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細胞(PLFs) 作為牙周膜的主體細胞,是牙周膜主要的間質細胞,它不僅具有合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復及再生過程。現在,利用牙周膜細胞建立體外模型,已經成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段。


細胞特性

1)細胞來源于人的正常牙組織。
2)細胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:成纖維樣細胞,貼壁培養。


質量檢測

優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養信息

培 養  基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳5代左右。3代以內狀態最佳
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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