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當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞復蘇/凍存大鼠骨骼肌成纖維細胞
大鼠骨骼肌成纖維細胞

產品簡介

大鼠骨骼肌成纖維細胞肌肉可分為肌腹和肌腱,其中兩端較細呈乳白色的部分為肌腱,呈索條或扁帶狀,由平行的膠原纖維束構成,色白,有光澤,但無收縮能力,腱附著于骨處與骨膜牢固地編織在一起,屬于結締組織,同時,肌腹的表面包以結締組織性外膜,向兩端則與肌腱組織融合在一起,這些結締組織是由成纖維細胞構成,具有支持、連接、保護和營養功能。

產品型號:復蘇/凍存
更新時間:2025-07-01
廠商性質:生產廠家
訪問量:499
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大鼠骨骼肌成纖維細胞

產品名稱 :大鼠骨骼肌成纖維細胞

產品貨號 :YLK-XB1230h

組織來源 :腦組織

產品規格 :5×105cells/T25細胞培養瓶


細胞簡介:

骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40% 。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。

肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A 帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H 線。H 線的中部有一M 線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段,叫做一個肌節。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞,細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方,細胞多呈梭行,具有一定的方向性。


細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常腿部肌肉組織。
2)細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規則細胞,貼壁培養。


量檢測

優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養信息

培 養  基 :  含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :  每2-3天換液一次
生長特性 :  貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 :  可傳5代左右;3代以內狀態最佳
傳代比例 :  1:2
消 化  液 :  0.25% 胰蛋白/酶
培養條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%

該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。


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